l15培养基怎么配?
配方是:Inorganic Salts (g/liter)
CaCl2 (anhydrous) 0.14000
MgCl2·6H2O 0.20000
MgSO4 (anhydrous) 0.09767
KCl 0.40000
KH2PO4 (anhydrous) 0.06000
NaCl 8.00000
Na2HPO4 (anhydrous) 0.19000
L-Alanine 0.22500
L-Arginine (free base) 0.50000
L-Asparagine·H2O 0.25000
L-Cysteine (free base) 0.12000
L-Glutamine 0.30000
Glycine 0.20000
L-Histidine (free base) 0.25000
L-Isoleucine 0.12500
L-Leucine 0.12500
L-Lysine·HCl 0.09370
L-Methionine 0.07500
L-Phenylalanine 0.12500
L-Serine 0.20000
L-Threonine 0.30000
L-Tryptophan 0.02000
L-Tyrosine·2Na·2H2O 0.43000
L-Valine 0.10000
Choline Chloride 0.00100
Riboflavin-5-PO4·Na·2H2O 0.00010
Folic Acid 0.00100
myo-Inositol 0.00200
Nicotinamide 0.00100
D-Pantothenic Acid 0.00100
Pyridoxine·HCl 0.00100
Thiamine·PO4·Cl·2H2O 0.00100
D-Galactose 0.90000
Phenol Red Sodium Salt 0.01000
Sodium Pyruvate 0.55000
4t1细胞用什么培养基养?
4T1细胞专用培养基如下,
经典的培养基有很多种,其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是应用最广泛的培养基。其他 如 M199 、 IMDM 、 L15培养基等也用于某些细胞的培养。
如细胞还不贴壁,将细胞离心收集移到新的培养瓶中,原培养瓶加部分新鲜培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。对于悬浮细胞:收到细胞后,将细胞全部离心,去掉旧的培养基,换成新鲜的培养基继续培养。
培养基怎么配?
培养基的配制:
1、称量和熬煮 按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。
2、加热溶解 把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
3、分装 按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
4、加棉塞 培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
5、包扎 加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。 培养基配制注意事项: 1、培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。 2、PDA培养基一般不需要调pH。对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。 3、调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。 4、培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。 5、培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.2g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性。