您的位置 首页 知识

lb培养基的配方及制作过程(固体lb培养基的配方)

LB培养基的配方?

配方:

胰蛋白胨(tryptone)10g

酵母提取物(yeast extract)5g

氯化钠(NaCl)10g

固体培养基另加 琼脂粉 15-20g

加双蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH至7.2,121℃灭菌30min

LB培养基,是微生物学实验中常用的培养基,用于培养大肠杆菌等细菌,其分为液态或是加入琼脂制成的固态培养基。加入抗生素的 LB 培养基可用于筛选以大肠杆菌为宿主的克隆。

lb固体培养基配方?

LB固体培养基1L和液体一样,加15g琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗生素,并且倒好板。

LB固体培养基倒板

1.配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉

2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。

3.倒板:一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。

4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。

lb培养基配方?

LB培养基的配方如下:

胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L;

酵母提取物(Yeast extract) 5g/L;

氯化钠(NaCl) 10g/L;

另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4,LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求,可分为液体培养基和固体培养基。

LB液体培养基是什么?

LB培养基的配方如下:胰蛋白胨(Tryptone)10g/L;酵母提取物(Yeastextract)5g/L;氯化钠(NaCl)10g/L另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4(该pH适合目前使用最广的原核表达菌种E.coli的生长)

lb培养基的配方及制作过程?

LB培养基的配制:

1.成分

胰蛋白胨(tryptone)10g

酵母提取物(yeast extract)5g

氯化钠(NaCl)10g

固体培养基另加 琼脂粉 15-20g

加双蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH至7.2,121℃灭菌30min

2.配制方法

①称量 分别称取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于烧杯中。

②溶化 加入所需水量2/3的蒸馏水于烧杯中,用玻棒搅拌,使药品全部溶化。

③调pH 用1mol/L NaOH溶液调pH至7.2。

④定容 将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。

⑤加琼脂 加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。

⑥分装、加塞、包扎。

⑦高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。

lb培养基的配制步骤?

LB培养基的配制方法:

  (1)称量:分别称取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于烧杯中。

  (2)溶化:加入所需水量2/3的蒸馏水于烧杯中,用玻棒搅拌,使药品全部溶化。

  (3)调节pH:用1mol/L NaOH溶液调pH至7.2。

  (4)定容:将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。

  (5)加琼脂:加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。

  (6)分装、加塞、包扎。

  (7)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌约20min。

lb固体培养基原理?

lb培养基由蛋白胨,酵母膏,nacl组成。首先,蛋白胨是经过胰酶处理过的蛋白,处理后,大分子的蛋白分子量变小,细菌更容易利用,此外,还含有嘌呤,提供生长因子。

如要培养大肠杆菌,其实用普通蛋白胨代替胰蛋白胨是没有问题的。蛋白胨为细菌的生长提供氮源。

其次培养基中的酵母膏酵母提取物主要成分是氨基酸,小肽,核甘酸,b族维生素,主要为细菌提供维生素和微量元素,是细菌生长所必须的。氯化钠在培养基中的作用是维持渗透压,兼能可提供无机盐。

lb肉汤培养基是什么?

lb肉汤培养基其实就是lb液体培养基。

LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求。也可用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)。可分为液体培养基和固体培养基,配置方法是相同的,固态培养基需要加入琼脂固化。

LB培养基配方:

在950毫升纯水中加入

胰蛋白胨10g

酵母提取物5g

NaCl 10g

摇动容器直至溶质溶解,用5mol/LNaOH调pH至7.0。用去离子水定容至1升。在15大气压下蒸汽灭菌21分钟。

培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌,通过培养工程菌,我们可以表达大量的外源蛋白,也可以拿到带有外源基因的质粒,工程菌的有效扩增是生化分子实验的基础。

lb溶液的用处?

LB液体培养基主要用于实验室培养细菌,常常在分子生物学中进行广泛的应用,主要的成分:酵母膏5g、胰蛋白陈10g、琼脂15~20g、NaCl10g,双蒸馏水1000mL,pH7.0的环境。制法:将各成分溶于1L的双蒸馏水中,用1mol/L的NaOH进行调节pH,然后经过分装后,0.IMPa灭菌15-20分钟左右的时间。如果有必要的话,也可在培养基中加入0.1%的葡萄糖。在半固体的培养基加入0.4%-0,5%的琼脂。

Lb液体培养基是供微生物、植物、动物组织生长用的养料,一般情况下必须含有碳水化合物、无机盐、含氮物质、维生素、水等。有的还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。Lb液体培养基由于配制的原料偶尔有所不同,所以使用的要求也不同,而贮存保管方面也当然也会稍有不同。一般在受热或者是吸潮之后,就会极易被细菌污染或者是产生分解变质,因此一般必须要注意防潮、避光,而且要在阴凉处进行保存。对一些需严格灭菌的培养基来说,如果需要较长时间的贮存,必须就要放在3~6℃的冰箱内进行保存,否则极易产生变质的情况。